原核细胞(原核生物的转录过程)
模板的识别字母娱乐网网:在亚基的帮助下,RNA聚合酶识别并结合到启动子上。
转录的起始:亚基识别-35序列并与核心酶一起结合在启动子上。当形成第一个磷酸二酯键后,亚基即由全酶中解离出来,由核心酶继续进行转录。
全酶的作用是选择起始部位并启动转录,核心酶的作用是延长RNA链。解离出来的可与另一个核心酶结合起来并启动另一次转录。
绝大多数新合成的RNA链的5′-末端是pppA或pppG,说明转录的起始核苷酸是三磷酸腺苷或三磷酸鸟苷。并且证明转录不需要引物引导,这一点与复制不同。
RNA链的延伸:当第一个磷酸二酯键生成并释出亚基后,核心酶即沿DNA模板移动,并按碱基互补配对的原则,以与第一个磷酸二酯键生成的相同反应方式,依次连接上核苷酸,使RNA链延伸。由于在转录过程中第一个三磷酸核苷的三磷酸基被保留在产物中,而其余的则否,所以RNA链的延长方向是5′→3′。核心酶沿DNA模板移动的方向则为3′→5′,因为模板链与新生成的RNA链是反平行的。
转录泡(transcription bubble), 在转录泡里,新合成的RNA与模板DNA形成杂交双链,长约12bp 。在转录泡里,核心酶始终与DNA的编码链结合,使双链DNA约有17bp被解开。
由于RNA聚合酶没有核酸外切酶活性,它不能校对新合成的RNA链,因而转录的误差比复制的大很多(约10万倍)。由于一个细胞中要合成一个基因的很多转录产物,因而可以耐受这样大的误差。
转录的终止:主要过程包括:停止RNA链延长;新生RNA链释放;RNA聚合酶从DNA上释放。
当RNA聚合酶沿DNA模板移动到字母娱乐网网基因3′-端的终止子序列时,转录就停止了。原核生物基因转录终止的方式有两种:不依赖于因子的终止和依赖于因子的终止。
因子又叫终止因子(termination factor),是从大肠杆菌中分离出来的一种275 000大小的六聚体蛋白质, 它具有两种活性:促进转录终止的活性和NTPase活性。后者是前者所必需的。
在不依赖于因子的终止方式中 有一段富含GC的序列,此GC区呈双折叠对称,即回文结构(palindrome structure);紧接在它后边是一段富含AT的序列。
而另一些终止子则需要终止因子的参与。体外实验证明,用同一DNA做模板,在有因子时合成的RNA比没有时要短,说明当RNA聚合酶遇到模板中的某些终止子时,在无因子的条件下,虽然也在此暂停,但不终止,一直转录到不需要因子的终止子处才真正终止。可见,因子能检定出那些单靠RNA聚合酶检定不出来的终止子。这类终止子的序列富含碱基C,但缺乏碱基G。
因子可能是先附着在新生成的RNA字母娱乐网网链上,然后沿着5′→3′方向朝RNA聚合酶移动,移动的能量由ATP水解供应。当因子与RNA聚合酶接触后,将新生成的RNA链释放出来。